目前,在我國農(nóng)業(yè)上廣泛使用的殺蟲劑,即有機磷類、氨基甲酸酯類和擬除蟲ju酯類農(nóng)藥。其中菊酯類農(nóng)藥對人畜的毒性較低,相對比較安全;而有機磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對高等動物(包括人)的毒性高,易引起人畜急性中毒事故,所以人們普遍關(guān)注的也主要是這兩類農(nóng)藥的殘毒問題,農(nóng)藥殘留檢測儀主要用于檢測有機磷和氨基甲酸酯兩大類農(nóng)藥。
檢測依據(jù)
《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量快速檢測》(GB/T5009.199-2003)
試劑組成及保存
1、緩沖液:取緩沖溶液試劑1袋倒入試劑瓶中,加蒸餾水(或純凈水)至500mL刻度線,溶解攪拌均勻,備用,室溫保存。
2、顯色劑:向標(biāo)有“顯色劑”的試劑瓶中加入12.5mL的緩沖溶液,溶解,混勻即可,50微升/次。在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷凍結(jié)冰。
3、底物:向標(biāo)有“底物”的試劑瓶中加入12.5mL蒸餾水,溶解、混勻即可,50微升/次。在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷凍結(jié)冰。
4、酶試劑:敲開玻璃試劑瓶將酶液倒入備用的白色空瓶內(nèi),直接使用,在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷凍結(jié)冰。
注意:由于瓶蓋中有可能沾染部分試劑粉末,溶解、配置時應(yīng)注意,不要使這部分試劑粉末損失。試劑盒原包裝不拆封在冰箱中冷藏保質(zhì)期為1年,常溫保質(zhì)期3個月。
樣品制備
1、擦去果蔬樣品表面泥土,稱取1g果蔬樣品(葉菜剪成寬度1厘米左右的菜樣,塊根菜取橫截面樣品)放入燒杯或提取瓶中,加入5mL緩沖溶液,振搖2分鐘。
2、若浸提液澄清無色或顏色較淺,可直接作為待測樣液;若浸提液渾濁,則需要過濾,濾液作為待測樣液。
3、若浸提液色素干擾,可對樣品進行整株提取。
4、蔥、蒜、辣椒、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。若需要處理這類樣品,可采用整株提取或配套我公司“特別蔬菜樣品前處理試劑盒”進行檢測。具體方法為:
擦去果蔬樣品表面泥土,稱取1g果蔬樣品(葉菜剪成寬度1厘米左右的菜樣,塊根菜取橫截面樣品)放入燒杯或提取瓶中,加入5mL緩沖溶液,振搖,靜置2分鐘。將提取液全部倒入另一支10ml離心管,加入2滴試劑A,搖勻沸水浴5min后,取出冷卻,迷你離心機(6000轉(zhuǎn)/min)離心2min,取2.5ml澄清液,按照樣品測定進行檢測。
樣品測定
對照液測試:對照液測試:取緩沖液2.5mL,酶試劑50微升,顯色劑50微升至5ml離心管中,室溫放置10分鐘或37℃水浴5min,然后加入50微升底物,搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中,及時放入儀器比色池通道中。(每次開機,對照溶液檢測只需進行一次即可,且必須放入1通道。)
樣品溶液測試:取待測樣品液2.5mL,酶試劑50微升,顯色劑50微升至5ml離心管中,室溫放置10分鐘或37℃水浴5min,然后加入50微升底物,搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中,及時放入儀器比色池中。
注:
(1)儀器每重新開軟件一次,第1通道必須放對照溶液,其他通道可以放樣品溶液,按<調(diào)零>鍵,出檢測結(jié)果。第二次檢測時不需要再放對照液,每個通道都可放入樣品溶液,按<檢測>鍵,出檢測結(jié)果。
(2)SA系列的儀器,對照和樣品檢測都按<檢測>鍵進行檢測,如需要重新做空白可以選擇界面上的“重做”選項。
結(jié)果判定
根據(jù)GB/T5009.199-2003要求,抑制率大于50%時檢測結(jié)果為陽性,小于50%為陰性,對于陽性樣品要有2次以上重復(fù)檢測。當(dāng)抑制率達到50%以上,表明被測樣品的農(nóng)藥殘留可能超過安全標(biāo)準(zhǔn),請用氣相色譜等仲裁方法確認(rèn)。
農(nóng)藥殘留檢測儀使用注意事項:
1、用于移取試劑或樣品的器具都要,避免交叉污染。
2、試劑使用時,必須遵循只出不進原則:從酶試劑、顯色劑、底物試劑瓶中移取出的試劑,不得返回試劑瓶中,以免污染原試劑。
3、使用試劑必須小心,若試劑不慎接觸皮膚,請立即用水清洗。